(一)清洗
由于物品清潔與否影響滅菌效果，除污物和液體外，對于實驗室使用的物品應該盡量先清洗干凈后滅菌，物品洗滌后，應干燥并及時包裝：
(二)包裝
1．包裝材料應允許物品內部空氣的排出和蒸汽的透人。市售普通鋁飯盒與搪瓷盒，不得用于裝放待滅菌的物品，應用自動啟閉式或帶通氣孔的器具裝放；
2．常用的包裝材料包括全棉布、一次性無紡布、一次性復合材料(如紙塑包裝)、帶孔的金屬或玻璃容器等。新包裝材料在使用前，應先用生物指示物驗證滅菌效果后方可使用。包裝材料使用前應仔細檢查有無殘缺破損；
3．布包裝層數不少于兩層。用下排氣式壓力蒸汽滅菌器的物品包，體積不得超過30cm~30cm~25cm；用于預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器的物品包，體積不得超過30cm~30cmX 50cm。金屬包的重量不宜超過～，敷料包不超過5kg；對于不符合上述要求的應該延長滅菌時間，并做好監測；
4．新棉布應洗滌去漿后再使用；反復使用的包裝材料和容器，應經清洗后才可再次使用，否則因影響透氣性而影響滅菌效果；
5．盤、盆、碗等器皿類物品，盡量單個包裝；包裝時應將蓋打開；若必須多個包裝在一起時，所用器皿的開口應朝向一個方向；摞放時．器皿間用吸濕毛巾或紗布隔開，以利蒸汽滲入；
6．滅菌物品能拆卸的必須拆卸，如對注射器進行包裝時，管芯應抽出。必須暴露物品的各個表面(如剪刀和血管鉗必須充分撐開)以利滅菌因子接觸所有物體表面。有篩孔的容器，應將蓋打開，開口向下或側放；
7．物品捆扎不宜過緊。
(三)裝載
1．下排氣
滅菌器的裝載量不得超過柜室內容量的80％；預真空
滅菌器的裝載量不得超過柜室容積90％，且不得小于柜室容積的10％和5％，以防止“小裝量效應”，因殘留空氣影響滅菌效果；
2．應盡量將同類物品放在一起滅菌，若必須將不同類物品裝放在一起，則以**難達到滅菌物品所需的溫度和時間為準；
3．物品裝放時，上下左右相互間均應間隔一定距離以利蒸汽置換空氣；大型
滅菌器，物品應放于柜室或推車上的載物架上；無載物架的中小型滅菌器，可將物品放于網籃中；
4．難于滅菌的物品放在上層，較易滅菌的物品放在下層；金屬物品放下層，織物包放上層，物品裝放不能貼靠門和四壁，以防吸人較多的冷凝水；
5．金屬包應平放，盤、碟、碗等應處于豎立的位置；纖維織物應使折疊的方向與水平面成垂直狀態；玻璃瓶等應開口向下或側放以利蒸汽進入和空氣排出；
6．啟閉式篩孔容器，應將篩孔的蓋打開。
(四)滅菌
1．蒸汽的質量是影響滅菌效果的主要因素，其質量應該符合要求，G外一般采用去離子水作為蒸汽的水源。必須安裝氣水分離器，使滅菌過程中蒸汽的飽和度合格。
2．滅菌操作程序應按
壓力蒸汽滅菌器生產廠家的操作使用說明書的規定進行；滅菌一般包括排氣、滅菌、干燥等過程。
3．壓力蒸汽滅菌溫度和時間的對應關系見表3―3。
4．滅菌物品需冷卻后再從擱架上取下。
壓力蒸汽滅菌所需時間（min）
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物品種類 121℃下排氣 132℃脈動真空
硬物(裸露) 15 3
硬物(包裹) 20 4
織物包 30 4
液體 30 4
